肉類商品的價值取決于其食用品質,在很多因素 中,嫩度是肉類品質指標中消費者最為關注的。影響 肉類嫩度的因素主要包括宰前因素(品種和基因型、動 物性別和年齡、飼養與宰前管理)與宰后因素(宰后肌 肉pH值和溫度變化、電刺激處理、胴體吊掛、肉 的成熟和烹飪方法等),決定肉嫩度優劣的主要因素 是宰后僵直過程中肌原纖維的收縮和蛋白酶降解關鍵肌 纖維骨架蛋白的程度,而如何快速提高宰后牛肉嫩度 和縮短牛肉成熟時間是工廠急需解決的問題。
1 材料與方法
1.1 材料與試劑
實驗牛選自新疆伊寧縣伊新牛羊養殖專業合作社, 并由該社屠宰加工廠協助開展屠宰實驗。 選取6 頭30 月齡新疆褐牛公牛,按照GB/T 19477—2018 《畜禽屠宰操作規程 牛》屠宰后,右半側胴體采 用傳統跟腱吊掛方式成熟,左半側胴體采用頸臂束縛 吊掛方式成熟,胴體排列整齊,推入排酸冷庫,間距 不少于10 cm,排酸冷庫設定溫度0~4 ℃,相對濕度 85%~90%。用尼龍繩在牛前臂遠端和牛第一、二頸椎 連接處捆綁,持續施加30 kg的徑向拉力,分別在宰后 0、1、2、3、7、14、21 d取背最長肌和股二頭肌樣品, 由于臂三頭肌質量不足以取到7 個時間點,故舍去2 d和 21 d 2 個時間點,在宰后0、1、3、7、14 d取臂三頭肌樣 品,按照各具體指標檢測要求處理、貯藏樣品。 氯化鉀、磷酸氫二鉀、磷酸二氫鉀、氯化鎂、疊 氮化鈉、乙二醇-雙-(2-氨基乙醚)四乙酸(ethylenebis (oxyethylenenitrilo)tetraacetic acid,EGTA)、氫氧化鈉、 酒石酸鉀鈉、鋨酸 天津市光復科技發展有限公司;胰蛋白酶、牛血清白蛋白標準品(均為生化試劑) 北 京索萊寶科技有限公司;試劑均為分析純。
1.2 儀器與設備
FJ200-S高速均質機 北京維欣儀奧科技有限公司; LG10-24A高速離心機 北京京立離心機有限公司; XS105電子天平 瑞士梅特勒-托利多儀器有限公司; H721可見分光光度計 天津普瑞斯儀器有限公司; TA-XT2i質構儀 英國Stable Micro System公司; DK-S28電熱恒溫水浴鍋 上海精宏實驗設備有限公司;H-7500透射電子顯微鏡 日本日立公司; GelDoc EZ凝膠成像系統 美國Bio-Rad公司;SX-500 高壓滅菌鍋 日本Tomy公司。
1.3 方法
去除肉樣可見脂肪后, 精確稱取2.00 g,加入溫度為2 ℃的MFI緩沖液(含 100 mmol/L KCl、11.2 mmol/L K2HPO4、8.8 mmol/L KH2PO4、1 mmol/L EGTA、1 mmol/L MgCl2和1 mmol/L NaN3)20 mL,于勻漿器中勻漿3 次,每次20 s,間隔 1 min;勻漿液在4 ℃條件下10 000 r/min離心15 min,棄 去上清液,沉淀中再次加入20 mL MFI緩沖液重新勻漿、 離心棄去上清液;沉淀中加入5 mL MFI緩沖液進行勻 漿,用200 目尼龍篩網過濾,去除結締組織,再用5 倍體 積的MFI緩沖液沖洗離心管并過濾,合并濾液,即為肌 原纖維蛋白懸濁液。用雙縮脲法測定所得肌原纖維蛋白 懸濁液質量濃度后,將其質量濃度用MFI緩沖液調整至 0.5 mg/mL,在540 nm波長處測定吸光度,所得數值乘以 200即為MFI。用透射電 子顯微鏡觀察肌纖維的超微結構,將肉樣切成 3 mm×1 mm×1 mm的長方體,用預冷的2.5%戊二醛溶 液固定4 h以上,0.1 mol/L磷酸緩沖液(pH 7.4)沖洗, 依次經體積分數50%、70%、80%、95%、100%乙醇脫水 15 min,無水丙酮置換后,包埋、切片、染色,用透射 電子顯微鏡進行觀察和拍照。
2 結果與分析
實驗組和對照組宰后3 個部位牛肉的pH 值沒有顯著差異。從宰后不同成熟時間看,宰后牛肉pH 值下降顯著(P<0.05),這是由于牛被宰殺后,牛肉組 織細胞開始進行無氧呼吸,細胞內的糖類物質經生化反 應生成乳酸,故在排酸成熟前期,乳酸以持續較快的速 率生成,使得牛肉的pH值下降較快。實驗組和對照組相比失水率顯著增加 (P<0.05);股二頭肌宰后成熟3 d時,實驗組和對照 組相比失水率顯著增加(P<0.05)。成熟過程中,pH值 的下降引起肌動球蛋白形成,導致蛋白質網狀結構空隙 減小,使水分更容易溢出,從而牛肉的保水性降低。 Hughes等研究表明,隨著肉成熟的進行,細胞骨架蛋 白的降解會減少肌原纖維收縮力的傳遞,使水分在肉中 保留,且成熟過程中肌原纖維會發生腫脹,容納更多的 水分,因此在成熟后期肉的保水性會有所改善,這與臂 三頭肌宰后成熟14 d、背最長肌和股二頭肌宰后成熟21 d 時失水率降低的結果相一致。
3 結 論
活牛被宰殺后,通過排酸成熟過程可以提高牛肉的 食用品質。通過研究成熟期間不同吊掛方式對牛肉品 質的影響發現:隨著排酸過程的進行,牛肉的硬度先增 大后減小,相較于普通跟腱吊掛,頸臂束縛吊掛能夠顯 著降低牛肉的硬度;MFI逐漸增大,頸臂束縛吊掛成熟 牛肉的MFI在多個時間點顯著大于普通跟腱吊掛;pH值 則是先降低后升高,而后達到正常新鮮牛肉的范圍,但 是2 種吊掛處理方式對牛肉的pH值沒有顯著影響;保水 性隨著成熟過程的進行逐漸減小,而在成熟后期又稍有 改善;通過觀察牛背最長肌的肌原纖維超微結構可以發 現,宰后成熟3 d實驗組牛肉肌節間隙明顯變寬,肌原纖 維發生大面積破壞、溶解。
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