1 材料和方法
大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、黃曲霉 菌為塔里木大學新疆建設兵團畜牧科技重點實驗室 冷凍保存的菌種,在4 ℃條件下,在斜面半固體肉湯 培養基中接種保存的菌種進行活化,將菌種在37 ℃ 恒溫培養箱中培養24 h備用。乳酸菌培養使用添加 2 g/l碳酸鈣的MRS固體培 養基,指示菌的篩選及培養使用肉湯培養基。肉湯培 養基測定pH 值為7.4~7.6后需要過濾,使用0.3 mol/l 氫氧化鈉滴定。
主要試劑:細菌DNA基因組提取試劑盒(天根深 化科技有限公司)、瓊脂糖、50%TBE溶液。 主要儀器:pH計(PHSJ-5,上海儀電科學儀器有限 公司),霉菌培養箱(MJX-160,寧波江南儀器廠),超凈 工作臺(SW-J-2FD,上海博迅實業有限公司),高壓滅 菌鍋(SX-500,上海法潤科學儀器有限公司),電子天平 (XP603S,瑞士梅特勒-托利多中國公司),電熱恒溫培 養箱(DNP9162,上海精宏實驗設備有限公司),超低溫 冰箱(DW-86L286,海爾集團公司),全溫型恒溫培養搖 床(TY-R70,天津市泰斯特儀器有限公司),優普系列超 純水器(UP-11-10T,四川優普超純科技有限公司)。
將實驗室篩選保存的乳酸菌菌種W、L、B、SW劃線于MRS斜面培養基中在30 ℃恒溫培養箱中無氧培養 24 h,挑取單菌落接種于MRS液體培養基中后在37 ℃ 恒溫培養箱中培養24 h,渦旋振蕩1 200 r/min,備用。
2 結果與分析
抑制大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和 黃曲霉菌效果最好的菌株為 SW,抑菌直徑分別為 (47.89±0.10)、(40.24±0.11)、(42.54±0.12)mm;其次L 對大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的抑菌效果較好,抑菌 直徑分別為(35.48±0.05)、(35.95±0.16) mm;W對黃曲霉菌的抑菌效果較好,抑菌直徑為(39.90±0.03) mm。 說明本研究中乳酸菌均對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌 和黃曲霉菌有抑菌作用,SW 抑菌效果最好。;SW對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和黃曲霉 菌 的 抑 菌 直 徑 分 別 為 (47.89 ± 0.10)、(40.24 ± 0.11)、 (42.54±0.12) mm。說明本研究中乳酸菌組合均對大 腸桿菌、金黃色葡萄球菌和黃曲霉菌有抑菌作用。 但 SW 對致病菌的抑菌效果比 W+L 和 B+SW 的組合 抑菌效果好。
3 討論
近年來,我國對乳酸菌抑菌作用的研究越來越 多,帕提古麗·毛拉紅等發現乳酸菌對金黃色葡萄 球菌、大腸桿菌和黃曲霉菌具有抑制作用;有人從動 物體內分離出對大腸埃希菌、沙門氏菌、金黃色葡萄 球菌、一些腐敗菌假單胞菌和希瓦氏菌都有很好的抑 制效果的乳酸菌;王志新等從東北酸菜中篩選 到發現一株對常見的食源性致病菌和腐敗菌具有較 強抑菌作用的植物乳桿菌;Li等從多種泡菜中發現 了產苯乳酸的植物乳桿菌;韓立英等發現在青貯中 添加乳酸菌對腐敗菌具有抑制作用。
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