1 儀器與材料
1.1 儀器
UV-2550 型紫外分光光度計;電子分 析天平(北京塞多利斯儀器有限公司);恒溫水 浴 鍋( 杭 州 庚 雨 儀 器 有 限 公司,HH-ZK2 型 ); R501 旋轉蒸發器(杭州庚雨儀器有限公司);KQ250DB 型數控超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有 限公司);MH-1000 型可調式電熱套(北京科偉永 興儀器有限公司);SHB- Ⅲ循環水式多用真空泵 (杭州庚雨儀器有限公司);低溫冷卻液循環泵(杭 州康雨儀器有限公司,DLSB-5/20 型);電熱恒溫 鼓風干燥箱(上海精宏實驗設備有限公司、太倉精 宏儀器設備,DHG-9070A 型)。
1.2 試劑與試藥
南天竹購于江蘇蘇州,經江西 中醫藥大學付小梅教授鑒定;鹽酸小檗堿對照品 (北京賽百草科技有限公司,純度:≧ 98%,批號: 633658);D101、HPD-722、AB-8、NKA- Ⅱ、 NKA-9、ADS-17 型大孔吸附樹脂、732 陽離子樹 脂(河北滄州寶恩化工有限公司);溴甲酚綠(上 海馨晟試化工科技有限公司,批號:20160908); 溴百里香酚藍(上海馨晟試化工科技有限公司
2 方法與結果
對照品溶 液的制備 精密稱取鹽酸小檗堿對照品約 12.8mg, 置 50mL 容量瓶中,加甲醇溶解并稀釋至刻度,搖勻, 精密量取 1mL 至 25mL 容量瓶中,加甲醇稀釋至刻 度,配成濃度為 10.24μg·mL-1 的鹽酸小檗堿對照 品溶液。酸性染料的配制 溴甲酚綠:稱取 0.1g 溴甲酚 綠粉末于研缽中,加入 2.8mL 的 NaOH,研磨至粉 末充分溶解后,加入 200mL 的蒸餾水稀釋,移入具 塞的廣口瓶中備用。溴百里香酚藍:稱取 0.1g 溴百 里香酚藍粉末于研缽中,加入 3.2mL 的 NaOH,研 磨至粉末充分溶解后,加入 200mL 的蒸餾水稀釋, 移入具塞的廣口瓶中備用。酸性染料比色法 精密吸取一定量的供試品 溶液,用 pH=5.0 的磷酸二氫鉀緩沖液 4mL 溶解, 轉移至含有酸性染料 3mL 的分液漏斗中,搖勻靜置 30min,加入氯仿 5mL,震搖靜置 10min,取氯仿 層,萃取兩次,合并。
3 討論
對南天竹總生物堿的含量測定方法未 見報道,南天竹生物堿主要是小檗堿類和原小檗 堿類衍生物。與上述母核結構相 類似的總生物堿含量測定的方法多采用酸性染 料比色法,該法主要針對生物堿類藥物,樣 品用量少,靈敏度高,具有一定的專屬性和準確度。優先出南天竹 總生物堿含量測定具體工藝。運用此方法需按照 嚴格步驟操作,盡量減少人為誤差。試驗中所配 制的酸性染料不宜使用時間過長,為保證數據偏 差,建議在 1 周內使用。生物堿于酸性染料形成 的絡合物易見光分解,注意避光。進行紫外測定 時,濃度過大測量結果的誤差增大,因此濃度不 易過大。
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